产品说明
考马斯亮蓝快速染色液(Coomassie brilliant blue Protein Stain Reagent)是以考马斯亮蓝为染色剂,主要用于SDS-PAGE和非变性PAGE凝胶电泳中蛋白的染色,也可检测WB后PAGE凝胶的残留蛋白。本产品采用全新配方,不含甲醇、乙醇和乙酸等有机溶剂,全程无挥发、清洁、安全,且用水即可脱色。用快染法数分钟即可完成染色。灵敏度高,可检测到10 ng蛋白条带。
使用说明
常规染色脱色方法:
1.电泳结束后,将凝胶置于容器中,加入100 ml双蒸水或去离子水,微波加热至沸腾后停止。也可以选择在摇床上摇动3-5 min,弃去水溶液。重复一次。此过程主要目的是洗掉page胶上的SDS。染色液,确保覆盖凝胶。
2.加入足量的染液(按盛胶容器的大小而定,以浸没胶面为准),微波加热10 sec,停止加热后继续摇床上摇动染色,大约1 min后能观察到蛋白条带,10 min左右大多数情况下染的足够强。
3.倒出染色液,加入50-100 ml的双蒸水或者去离子水,微波加热至沸腾,停止加热后继续在脱色摇床上摇动5-10 min,换水即可完成脱色,观察结果。
注意事项
1.洗胶的步骤非常关键。减少洗胶的次数或者减少用水的体积可能导致胶变得灰白,这有可能是由于胶中残留的SDS导致的。
2.常规方法耗时较长,但检测灵敏度更高,染色效果更加稳定。快速方法染色脱色速度快,通常检测灵敏度略低,微波炉加热时会出现溶液暴沸导致凝胶碎裂的情况,需特别小心。
3.染色时间取决于凝胶厚度和染色时温度。凝胶厚,温度低,染色时间长;凝胶薄,温度高,染色时间短。凝胶和染色液的颜色一致,在染色液中看不清凝胶时,即为充分染色。染色时间延长效果也更好。
4.脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸,部分染料会吸附在吸水纸上,会加快脱色。脱色时间过长会导致蛋白条带的颜色变浅。
5.操作时请穿戴实验服和一次性手套。
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