Labgreen 使用方法

1．胶染法（用法同 EB）（推荐方法）

制胶时加入 GelGreen 核酸染料。（例如：每 50mL 琼脂糖溶液中加入 5μL GelGreen10,000× 储液）。 按照常规方法进行电泳。 此方法染色染料用量相对较少。500μL 染料大约可以做 100 块 50mL 的胶。

GelGreen 兼容所有常用的电泳缓冲溶液。如果条带弥散或分离不理想，建议使用泡染法染色，如果问题依旧存在，则说明问题与染料无关，请尝试：降低琼脂糖浓度；选用更长的凝胶；延长凝胶时间以保证边缘清晰；改进上样技巧或选择泡染法染色。对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。

GelGreen 具有良好的热稳定性，可以在热的琼脂糖溶液中直接添加，也可以选择将 GelGreen 储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中，然后加热以制备琼脂糖凝胶。

2．泡染法

按照常规方法进行电泳。用水将 GelGreen（10,000×）储液稀释约 3,300 倍到 0.1M NaCl 中，制成 3× 染色液。（例如将 15μL GelGreen 10,000× 储液和 5mL 1M NaCl 加到 45mL H2O 中）。将凝胶小心地放入合适的容器中，如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的 3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色 30min 左右。

注：用泡染法染色时，染料用量较多。单次制备的染色溶液可重复使用 3 次左右。

GelGreen 的特点

1. 无毒性：GelGreen 独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内，艾姆斯氏试验 结果也表明，该染料的诱变性远小于 EB。

2. 灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于 SYBR Green I。

3. 稳定性高：适用于微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶；室温下酸或碱缓冲液中极其稳定，耐光性强。

4. 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。

5. 操作简单：在预制胶和电泳过程中染料不降解；而电泳后染色过程也只需 30 分钟且无需脱色或冲洗，即可直接用可见光凝胶透射仪观察。

GelGreen 可选择电泳前染色（胶染法）或电泳后染色（泡染法）；适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳；可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容：适用于使用 254nm 激发的紫外凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置。

注意事项

用泡染法染色时，染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用 3 次左右。3× GelGreen 染色液可以大量制备，在室温下避光保存直至用完。使用紫外成像仪，请选择 LabRed；使用激光成像仪或可见光下观测，请选择 GelGreen。尽管在凝胶染色方面，GelGreen 优于 SYBR Green I，但并不推荐在 qPCR 中使用 GelGreen 。对于qPCR，推荐专为 qPCR 设计的 SYBR Green I 及 EvaGreen。在极少数情况下，质粒经某些酶切后的 DNA 样品会出现拖尾和分辨率降低，此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更加合适。