产品简介

活性氧（Reactive oxygen species, ROS）包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等， 参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。

本试剂盒采用的 DCFH-DA(2， 7-Dichlorofuorescin Diacetate)探针，是迄今最常用、最灵敏的细胞内活性氧检测探针。DCFH-DA 本身没有荧光， 可以自由穿过细胞膜，当其进入细胞内后，会被细胞内的相关酯酶水解为 DCFH（Dichlorofluorescin）。而 DCFH 不能通透细胞膜，从而使探针很容易被标记到细胞内。当细胞内有活性氧存在时，DCFH 被氧化为强绿色荧光 物质 DCF（Dichlorofluorescein），其荧光在激发波长 488nm，发射波长 525nm 附近有最大波峰，其荧光强度与 细胞内活性氧水平成正比。一般细胞内活性氧的升高是细胞凋亡的标志之一。该活性氧检测系统本底低，灵敏 度高，重复性好，操作简便。 工作波长：最佳激发波长 488，最佳发射波长 525 (53020 nm)。也可按照 FITC 荧光检测条件检测。

注意事项

1、悬浮荧光探针标记后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景不干净荧光值偏高。

2、重悬的细胞密度可根据细胞的荧光强弱进行调整，如荧光较强可将细胞密度调小，如荧光较弱可将细胞密 度调大，但所有样本的细胞密度应保持一致。

3、测定细胞样本时，对于药物作用时间在 2 小时以内的细胞，一般建议先标记探针，然后再用药物刺激细胞， 对于药物作用时间需要在 6 小时以上的细胞，可以先用活性氧阳性对照及药物刺激细胞，然后再标记探针。

4、同时取部分单细胞悬液经过超声或匀浆破碎处理，用于蛋白的测定（蛋白定量试剂盒本所有售，推荐 A045-2 考马斯亮蓝法蛋白定量试剂盒、A045-3 BCA 法蛋白定量试剂盒），用于结果计算表示为荧光度值/毫克蛋白。

5、荧光一般是用荧光发射的强度，不过由于不同的仪器表示方法不一样，有的用光能量，有的用光子计数， 不同的仪器测定值之间没有可比性，一般都用相对值表示。因此其单位是任意单位(Arbitrary Unit，AU)。