产品简介
吡哆醛(pyridoxal,PL)是维生素 B6 的组成成分之一,是氧化吡哆醇所得到的醛,广泛存在 于肉类、谷类、蔬菜及坚果中。吡哆醛在生物体内主要的活性辅酶形式是磷酸吡哆醛(PLP),是 转氨酶、脱羧酶、消旋酶等多种酶的辅酶。 吡哆醛在一定条件的光激发下具有荧光效果,可以利用高效液相色谱法荧光检测器测定其含 量。荧光检测器灵敏度较高,常用于痕量分析。
产品内容
提取液:液体 30 mL ×1 瓶,4℃保存;本提取液中含有不溶物,需摇匀后使用。
试剂一:液体 5 mL ×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 1.5 mL ×1 瓶, 4℃保存。
试剂三:粉剂×2 瓶,4℃保存。
标准品:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入 0.821 mL 蒸馏水配制成 5 mg/mL 吡哆醛标准 溶液,4℃密封保存,避免阳光直射。
实验前准备工作
1. 将 1 瓶试剂三溶解到 1000 mL 超纯水中,再加入 0.55 mL 的试剂二,混匀,得到流动相 A。
2. 将 1000 mL 配制好的流动相 A、甲醇(色谱纯)用滤膜抽滤。(配制好的流动相 A 采用 0.22 µm 水系滤膜抽滤,甲醇采用 0.45 µm 有机系滤膜抽滤)。
3. 将抽滤好的流动相超声 20 min,除去气泡。
4. 标准品的配制:将 5 mg/mL 的吡哆醛标准溶液采用倍比稀释的方法分别用蒸馏水稀释成 16000ng/mL、3200 ng/mL、640 ng/mL、128 ng/mL、25.6 ng/mL 的吡哆醛标准溶液。(标准品浓度 仅供参考,可根据实际样品浓度进行调整)。4℃避光保存(密封),测试前采用水系针头式过滤 器过滤到棕色进样瓶内,待测。
试验中所需的仪器和试剂
高效液相色谱仪(Polaris C18-A 色谱柱(4.6×250 mm),荧光检测器(FLD))、台式离心机、 可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP 管(1.5 mL)、针头式过滤器(水系)、注射器、抽滤器、滤膜 (水系、有机系)、棕色进样瓶、超纯水、甲醇(色谱纯)。
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