膜再生液/抗体清除液(含β-ME)

货号:SL1341
品牌:Coolaber
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产品简介

膜再生液亦即Western一抗、二抗去除液(Stripping buffer),用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗、二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用膜再生液,充分去除一抗、二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样所形成的误差,使可比性更强。

使用膜再生液多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱。但是,本品经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5次。使用本试剂只需大约30-40分钟即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western操作。

 

使用说明

1. 在完成Western化学发光检测后,蒸馏水中漂洗5分钟。

2. 弃蒸馏水,加入适量的膜再生液(含β-ME),至少需把膜完全覆盖。置50℃水浴箱中30min,间断振摇。

3. 弃膜再生液(含β-ME),并吸尽残余液体。加入TBS、TBST或PBS漂洗3-4次,每次在摇床上漂洗3-5分钟。

4.进行封闭(blocking)等Western的后续操作。

 

注意事项

1.使用辣根过氧化物酶(HRP),任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶,如果使用碱性磷酸酯酶,任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。

2.膜再生液(含β-ME)仅适用于PVDF膜。用于硝酸纤维素膜时会导致转移到膜上的蛋白有非常显著的损失。

3.使用ECL、BeyoECL等类似的化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测,例如DAB,NBT/BCIP,不适用于本试剂。

4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

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