产品特点
溴化乙锭是一种高度灵敏的嵌入性荧光染色剂,为强致癌诱变剂,但价格便宜。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每 2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。EB的这种特性使其成为一种核酸染料,常用于琼脂糖凝胶电泳中的核酸染色。溴化乙锭在紫外区302nm和366nm处 有吸收峰,在紫外光的照射下,溴化乙锭可被激发出橙红色的荧光(590nm)。结合有DNA的溴化乙锭复合物的荧光强度要比没有结合DNA的染料高出 20-30倍,因此溴化乙锭可检测到少至10ng的DNA条带,非常灵敏。
使用方法
1.胶染法
1.1 制胶时加入GelRed核酸染料。每100mL胶中加入2-5μL EB 核酸染料。
1.2 按照常规方法进行电泳即可。
2.泡染法
2.1 按照常规方法进行电泳。
2.2 用1×电泳缓冲液稀释EB溶液至0.5-1ug/mL的浓度,将电泳后的琼脂糖胶浸泡在EB溶液中,摇床摇晃10-20分钟。染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的稀释溶液轻轻地倒在胶板上,让稀释液均匀地覆盖整个胶板,并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
注:用泡染法染色时,染料用量较多。单次制备的染色溶液可重复使用3次左右。
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