考马斯亮蓝快速脱色液

货号:SL1300
品牌:Coolaber
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有效期:2年
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产品说明

考马斯亮蓝快速染色液(Coomassie brilliant blue R250 Protein Stain Reagent)是以考马斯亮蓝R-250为染色剂,主要用于SDS-PAGE和非变性PAGE凝胶电泳中蛋白的染色,也可检测WB后PAGE凝胶的残留蛋白。本产品用快染法数分钟即可完成染色。

考马斯亮蓝快速脱色液(Coomassie brilliant blue R250 Protein destain Reagent)适用于蛋白凝胶考马斯亮蓝染色后脱色的溶液。常规脱色1小时即可观察到蛋白条带,快速脱色20分钟即可观察到蛋白条带。

 

使用说明

常规染色脱色方法:

1.电泳结束后,将凝胶置于培养皿内,加入染色液,确保覆盖凝胶。

2.置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温染色1小时或更长时间。

3.倒出染色液(可重复使用2-3次)。加入脱色液,确保覆盖凝胶。

4.置于摇床上缓慢摇动,室温脱色4-24小时。期间更换脱色液2-4次,至蓝色背景全部脱去,蛋白条带染色达到预期效果。一般脱色1-2小时后蛋白条带即可出现。

5.脱色后,凝胶保存在水中,用于拍照等。水中的凝胶会发生溶涨,如需避免溶涨,可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。

快速染色脱色方法:

1.电泳结束后,将凝胶置于适量考马斯亮蓝染色液中,微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止加热。胶浓度大于10%的凝胶比较坚韧,煮沸时不易破损;胶浓度小于10%的凝胶,尽量避免煮沸。

2.在染色液温度较高的情况下,随即在摇床上摇动5-10分钟。

3.倒出染色液(可重复使用2-3次)。加入适量脱色液,确保覆盖凝胶。

4.微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止加热。

5.在脱色液温度较高的情况下,随即在摇床上摇动5-10分钟。随后通常能观察到比较清楚的蛋白条带。

6.更换新鲜的脱色液,重复步骤4和步骤5,直至蓝色背景全部脱去,蛋白条带达到预期染色效果。

7.脱色后,凝胶保存在水中,用于拍照等。或置于含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。

 

注意事项

1.常规方法耗时较长,但检测灵敏度更高,染色效果更加稳定。快速方法染色脱色速度快,通常检测灵敏度略低,微波炉加热时会出现溶液暴沸导致凝胶碎裂的情况,需特别小心。另外微波炉加热加速染色液和脱色液中的乙酸挥发,最好在通风橱中进行。

2.染色时间取决于凝胶厚度和染色时温度。凝胶厚,温度低,染色时间长;凝胶薄,温度高,染色时间短。凝胶和染色液的颜色一致,在染色液中看不清凝胶时,即为充分染色。染色时间延长效果也更好。

3.脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸,部分染料会吸附在吸水纸上,会加快脱色。脱色时间过长会导致蛋白条带的颜色变浅。

4.操作时请穿戴实验服和一次性手套。

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