产品简介
EDTA 抗原修复液(EDTAAntigen Retrieval Solution)是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。EDTA 抗原修复液可以有效去除细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后导致蛋白之间的交联(cross-link),暴露样品中被遮蔽的抗原位点,改善免疫染色效果。通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善,特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上分析,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效暴露抗原表位,改善免疫染色效果。本产品可以配制成 5000 毫升抗原修复液(1×)。按照每个片子需要 10 毫升抗原修复液(1×)计算,一个包装的本产品可以用于 500 个样品。
使用方法
1. 对于石蜡切片:
a. 脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡 5 分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡 3 次。无水乙醇 5 分钟,两次。90%乙醇 5 分钟,两次,70%乙醇 5 分钟,一次。蒸馏水 5 分钟,两次。
b. 抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约 15 分钟 (加热时间可以控制在 10-20 分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。随后放置冷却 20-30 分钟至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
注意:抗原修复液(1X)使用前需预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。
2. 对于冰冻切片:
用免疫染色洗涤液洗涤切片 5 分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约 15 分钟(加热时间可以控制在 10-20 分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×) 使用前需预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后放置冷却 20-30 分钟至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
注意事项
1. 本抗原修复液使用前必须用重蒸水或 MilliQ 水稀释 50 倍,配制成抗原修复液(1X)。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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