HiTrap IMAC FF 预填充有 IMAC Sepharose 6 FF 填料。该填料可选择性共价偶联金属离子,以形成螯和金属离子亲和层析 (IMAC) 来纯化多组氨酸标签蛋白。
IMAC Sepharose FF 未共价偶联金属离子。用户可选择性共价偶联过渡金属离子(例如 Cu2+、Zn2+、Ni2+ 或 Co2+);这些金属离子与以共价作用螯和在琼脂糖凝胶上配基结合。
IMAC Sepharose 6 FF 填料由 90 µm 高度交联的琼脂糖基架组成,且其螯合基团已共价偶联金属离子。该螯合基团可以共价偶联目标靶蛋白特定的金属离子。IMAC Sepharose 6 FF 填料的粒径可实现高速流性能,使该填料成为实验室规模下放大和生产规模下纯化带组氨酸标签的蛋白的极佳选择。低金属离子脱落意味着纯化蛋白的活性得以保留,沉淀风险降低,从而可提高靶蛋白的纯度、活性及产量。在正常条件下,自 IMAC Sepharose 6 FF 填料脱落至靶蛋白洗脱池中的金属离子水平通常较低。
IMAC Sepharose 6 FF 填料具有较高稳定性,并与多种常见添加剂兼容。这有助于维持生物活性并提高产品产量,同时可极大扩展适用的操作条件范围。
该填料可预填充在 HiTrap、HiScreen 和 HiPrep 层析柱中,便于在实验室规模下纯化带组氨酸标签的蛋白。使用 1 mL HiTrap IMAC FF 层析柱进行的小规模纯化可利用 5 mL 层析柱进一步放大。使用 20 mL HiPrep IMAC FF 16/10 层析柱可进一步扩大纯化规模。柱床高度为 10 cm 的预填充 HiScreen IMAC FF 可用于方法优化和工艺开发。
3、IMAC Sepharose 6 Fast Flow, HiPrep IMAC FF 16/10, and HiTrap IMAC FF data file
4、Columns and resins for antibody purification and immunoprecipitation selection guide
5、Prepacked chromatography columns/formats—reference guide
6、Total solutions for preparation of histidine-tagged proteins - Selection guide
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