产品说明

发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌，它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。C58C1发根农杆菌菌株含有pRiA4b农杆碱型Ri质粒，具有广泛的宿主范围（蔷薇科，夹竹桃科，豆科，茄科，黄芩，烟草等），同时具有链霉素，利福平抗性。本公司生产的C58C1化学转化感受态细胞经特殊工艺制作，pCAMBIA2301质粒（12739bp，KanR）检测转化效率>104 cfu/μg DNA。

基因型

Agrobacterium rhizogenes (strR, rifR) pRiA4b (agropine type) 

使用方法

1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。

2. 每100 μL 感受态加入0.01-1 μg质粒DNA（转化效率较高，第一次使用前最好做预实验确定所加质粒 的量），用手快速拨打管底混匀，依次于冰上静置5 min、液氮5 min、37℃水浴5 min、冰浴5 min。

3. 加入700 μL无抗生素的TY液体培养基，于28℃振荡培养2~3 h。

4. 6000 rpm 离心 1 min 收菌，留取100 μL左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的TY平板上， 倒置放于28℃培养箱培养2-3天。

注意事项

1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降； 质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。

2. 混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀，务必使质粒快速、均匀分散开，与感受态细胞充分 接触。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

3. 平板上阳性克隆密度过大时，由于营养不足，阳性克隆生长变慢，菌落变小，为了获得大的菌落，应减 少质粒用量。

4. C58C1 具有链霉素、利福平抗性，不可用于具有链霉素抗性或利福平抗性质粒的转化。