■ 制品内容 | |||||||||||
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■ 制品说明 | |||||||||||
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■ pMD 18-T Vector的结构 | |||||||||||
■ 注意事项 | |||||||||||
1. Solution I 请于冰中融解。 2. 克隆时使用的Insert DNA片段 (PCR产物) 建议进行切胶回收纯化,否则PCR产物中的短片段DNA (甚至是电泳也无法确认的非特异性小片段)、残存引物等杂质都会影响TA克隆效率。 3. 按照本实验操作进行连接后,直接进行转化时的连接液不要超过20 μl。当要转化的DNA量较大或准备进行电转化时,需对连接液进行乙醇沉淀,纯化DNA后再进行转化。进行乙醇沉淀时使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。 4. 连接反应请在25℃以下进行,温度升高 (>26℃) 较难形成环状DNA。连接效率偏低时,可适当延长连接反应时间至数小时。 5. 本制品来源于pUC18载体,因此,适合pUC18载体的感受态细胞都可以使用,如:JM109等。 |
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