产品说明

IPTG是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质。蓝白斑筛选中，IPTG作为安慰性诱导物诱导细菌内的蛋白表达，X-gal作为生色底物。其原理为IPTG可诱导载体Lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段，该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补（α互补），实现α互补的细菌铺在含有X-gal生色底物的培养基上，可形成蓝色菌落；而外源DNA插入质粒的多克隆位点后，可破坏α互补作用，培养基上将长出白色菌落。IPTG也是常用的基因工程中重组蛋白表达的诱导剂。

0.1 M IPTG储存液配制：

1）称取0.238 g IPTG；加入去离子水至10 mL，完全溶解；

2）用5-10 mL去离子水润湿0.22 μm针头过滤，IPTG溶液过膜除菌；

3）分装成1 mL，-20℃冻存，有效期可达1年。

蓝白斑筛选：

（1）制作平板：将100 mL含琼脂培养基高压灭菌后的冷却至55℃以下时，加入500 μL的X-gal溶液（20 mg/mL）、250 μL的IPTG溶液（50 mg/mL）和100 μL的抗生素（氨苄青霉素，100 mg/mL），制作成含X-Gal、IPTG 和抗生素（Amp）平板培养基。

实际操作中X-gal和IPTG可以直接涂抹在平板培养基表面，90 mm的平板，X-gal（20 mg/mL）涂40 μL，IPTG（50 mg/mL）涂16 μL。150 mm的平板使用量加倍，待涂布的液体干后就可以使用。

（2）细菌铺板：37℃过夜培养，可根据长出菌体的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体（白色菌落为具有DNA插入片段的基因重组体）。

注意事项

1. 含有IPTG的培养基4℃避光保存，须在1周内使用。

2. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。

3. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。