■ 制品内容 (200 次量) | |||||
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■ 制品说明 | |||||
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■ 注意事项 | |||||
1. 制作感受态细胞时应使用专用的玻璃器皿或塑料容器。洗刷这些玻璃器皿或塑料容器时应尽量洗净。由于微量的洗涤剂或污染物都可能降低感受态细胞的转化效率,因此在洗刷完用于制作感受态细胞的专用玻璃器皿或塑料容器后,建议用去离子水浸泡一晚,然后再充分洗净。 2. 制作感受态细胞时使用的菌种,不应使用4℃或常温保存的传代细菌。应使用-70℃保存的菌种,在LB/抗生素平板培养基上分级划线培养后,挑取单菌落。使用这种菌种制作的感受态细胞,能提高转化效率。 3. 培养感受态细胞制备用菌体时,OD600值的测定应随时进行,以使OD600值控制在0.35~0.5之间。如果OD600值超出此范围,可能降低感受态细胞的转化效率。 4. 用于感受态细胞制备的菌体培养停止后要立即处理,不要将培养液过长时间室温放置,在冰中放置时也不要时间过长。 5. 感受态细胞的制备操作过程中,离心后弃上清时要尽量弃尽,否则会降低感受态细胞的转化效率。 6. 使用Solution A、Solution B悬浮沉淀时要用手指轻轻弹动Microtube管壁,禁止剧烈振荡操作。 7. 为了有效确认感受态细胞的转化效率,建议制作一批高纯度的质粒DNA分装低温 (-20℃) 保存,用作阳性对照,以确认每批制作的感受态细胞的转化效率。 | |||||
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