特点
产品详情
RNeasy 96 QIAcube HT Kit能够在QIAcube HT仪器上,从动物或人类细胞和组织样本中,便利的自动纯化RNA,或包含miRNA在内的总RNA。该试剂盒采用成熟的RNeasy硅胶模技术和便利的96孔板规格,能够去除抑制剂和污染物,纯化的高品质RNA即用于下游分析。
性能
在QIAcube HT上使用RNeasy 96 QIAcube HT Kit纯化RNA十分便利、可靠,在96孔板上无明显的孔间差异(参见 Linear RNA recovery and Reproducible 96-well RNA purification)。
这一经济、易用的产品纯化的RNA品质与其他备受信赖的QIAGEN纯化试剂盒相同(参见 Automated purification of RNA from tissues)。使用QIAxcel Advanced对纯化产物RNA进行分析,其RIS(RNA完整度值)高,在实验中的表现与其他QIAGEN纯化方案所获得的产物相当(参见 High-quality RNA from tissues)。
细胞系 | 来源 | RNA产量 (µg /105 个细胞)* |
---|---|---|
HeLa | 人子宫颈癌细胞 | 1.6 |
LMH | 鸡肝癌细胞 | 1.3 |
COS-7 | 猴肾,SV-40 transformed | 3.1 |
Huh7 | 人肝癌细胞 | 2.0 |
Jurkat | 人T细胞白血病 | 1.4 |
K-562 | 人慢性粒细胞白血病 | 1.9 |
* 不同物种、发展阶段和生长条件会导致不同产量。如果RNeasy实验流程富集的是 >200个核苷酸的RNA,总RNA产物中不包含5S rRNA、tRNA或其他低分子量RNA(占细胞总RNA的15–20%)。
原理
RNeasy 96 QIAcube HT Kit能够在QIAcube HT仪器上,从5 x 105个动物或人类细胞或40 mg以内的组织中自动纯化RNA或包含miRNA在内的总RNA。依据不同起始材料和所需产物大小,提供6种实验方案。细胞样本可以直接使用RNeasy 96 QIAcube HT Kit和专用的实验方案进行纯化。 组织样本(<40 mg)和需要纯化小RNA的样本需要先在QIAzol Lysis Reagent中裂解。纯化产物为高品质RNA,在众多下游应用中表现出色。
RNeasy 96 QIAcube HT Kit结合了硅胶模的选择性结合特性和96孔板的高通量优点,可在QIAcube HT仪器上全自动同时处理24–96个样本。
从细胞中纯化总RNA的规格
规格 | 描述 |
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样本数量 | 24–96个样本(每批8个) |
样本起始体积 | 最多5 x 105个细胞,需在140 μl Buffer RLT中匀浆 |
洗脱体积 | 110 μl |
时间长度 | 大约93或114*分钟内处理96个样本 大约54或73*分钟内处理24个样本 |
* 包括可选的DNase消化步骤。
从组织中纯化总RNA的规格
规格 | 描述 |
---|---|
样本数量 | 24–96个样本(每批8个) |
样本起始体积 | 从40 mg冰冻的活20 mg稳定的组织(在750 μl QIAzol Lysis Reagent中匀浆)中获得的350 μl水相 |
洗脱体积 | 110 μl |
时间长度 | 大约73或93*分钟内处理96个样本 大约34或54*分钟内处理24个样本 |
* 包括可选的DNase消化步骤。
规格 | 描述 |
---|---|
样本数量 | 24–96个样本(每批8个) |
样本起始体积 | 从40 mg冰冻的活20 mg稳定的组织(在750 μl QIAzol Lysis Reagent中匀浆)中获得的350 μl水相 |
洗脱体积 | 110 μl |
时间长度 | 大约78分钟内处理96个样本 大约38分钟内处理24个样本 |
操作流程
在高度易变性条件下,用异硫氰酸胍使RNase失活,手动裂解细胞,确保纯化得到完整的RNA。开始操作后,在裂解液中加入乙醇,达到合适的结合条件,然后将样本加入RNeasy 96孔板。总RNA和污染物被高效洗去。之后用少量的不含RNase的水洗脱获得高品质RNA,可即用于多种下游应用。
按照从动物或人类细胞中纯化总RNA的自动实验方案进行操作,可纯化获得长于200个核苷酸的RNA。此方法可富集mRNA,因为多数RNA小于200个核苷酸(例如5.8S rRNA、5S rRNA和tRNA,其总共占总RNA的15–20%)已被选择性去除。纯化的RNA的长度与CsCl离心纯化法(笑RNA不会沉淀下来)得到的RNA长度相当。
如需从组织中纯化总RNA,或从细胞和组织中纯化包含小RNA在内的总RNA,我们推荐使用QIAzol Lysis Reagent裂解。详细实验方案请参见试剂盒说明书。
应用
RNeasy 96 QIAcube HT Kit可高通量、高效的纯化RNA,可用于药物研究和科研等多领域。纯化的RNA即用于多种下游应用,包括:
【温馨提示】本试剂盒需搭配950067在QIAcube HT仪器上使用。
快速启动实验方案 (4)
1、RNeasy 96 QIAcube HT Kit Quick-Start Protocol
2、miRNeasy 96 QIAcube HT Quick-Start Protocol
3、RNeasy 96 QIAcube HT Quick-Start Protocol part 1
4、RNeasy 96 QIAcube HT Quick-Start Protocol part 2
产品介绍与指南 (1)
QIAcube HT — Your Purification Expert
用户使用手册 (2)
1、QIAcube HT User Manual for use with QIAcube HT Prep Manager Software v1.1.1
2、QIAcube HT User Manual for use with QIAcube HT Operating Software 4.17
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