产品简介
T4 RNA 连接酶 2 ( 截短型 ) 可特异性催化 5’-P 腺苷化的DNA 或 RNA 与 RNA 的 3’-OH 连接。本产品不需 ATP 来发挥活性,但需要供体底物的 5’-P 腺苷化。通过对野生型蛋白的截短改造,使得本产品失去了对非腺苷化 5’-P 的 DNA或 RNA 与 RNA3’ 羟基的连接活性,因此,如果供体 5’-P进行腺苷化修饰,那么应用本产品可特异性的将其连接到受体 RNA 的 3’端,从而有效降低非目标连接产物的背景。本产品通过大肠杆菌重组表达。包含野生型蛋白的 N 端 249个氨基酸残基,分子量约为 30.5 kDa。
产品特点
■ 特异的催化 5’-P 腺苷化的 DNA 或 RNA 与 RNA 3’-OH 的高效连接,背景更低
■ 蛋白比活性高,稳定性好
适用范围
1. 在二代测序(NGS)应用中,主要用于 miRNA 文库构建中 RNA 的 3’端接头的连接。
2. 5’-P 腺苷化的 DNA 或者 RNA 标签与任何种类 RNA的 3’端连接。
单位定义
在1×T4 RNA Ligase 2, Truncated Buffer反应液中,20 μl反应体系下,37℃,30 min内使0.4 μg等摩尔比的5'FAM标记的17 nt单链RNA与5'腺苷化的18 nt单链DNA连接50%时,所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
酶蛋白性质描述
性质 | 蛋白描述 |
蛋白纯度 | >99% |
酶活性 | 30,000 U/mg |
单链核酸外切酶 | 50 U酶中,<5.0% |
双链核酸外切酶 | 50 U酶中,<1.0% |
双链核酸内切酶 | 50 U酶中,未检出 |
宿主基因组污染 | 50 U酶中,<10拷贝 |
非特异性RNase残留 | 50 U酶中,未检出 |
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