特点

    · RNA的即时稳定和RNA保护

    · 在室温下操作方便安全

    · 在可重新闭合的试管中轻松收集和储存组织

    · 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的稳定性

    · 无需从分选或培养的细胞中除去培养基

产品详情

RNAprotect试剂和试管提供组织、革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌培养物以及分选或培养细胞中RNA的即时RNase失活和稳定，以保持基因表达谱，并实现高质量RNA的可重复纯化。在RNA分离程序之前，样品在室温下稳定。

性能

RNAprotect组织试剂确保RNA酶立即失活，并在收获和储存期间稳定和保护样品的RNA表达模式（见图“RNAProect试剂防止组织中的mRNA降解”）。RNAprotect技术的即时保护确保下游分析真实反映完整组织的表达谱。即使在多次冻融循环后，样本也可以在没有RNA降解风险的情况下存档（参见图“组织中的稳定RNA：不同温度和冻融循环”和“RNA保护组织管防止组织中的RNA变化”）。

RNAprotect细胞试剂可防止在处理过的细胞中诱导基因表达，并在细胞样品储存期间保持和稳定转录水平（见图“有效抑制PMA诱导c-fos表达”和“更可靠的CD83转录定量”）。

RNAprotect细菌试剂适用于多种细菌，包括革兰氏阳性菌（如金黄色葡萄球菌和鸟分枝杆菌）和革兰氏阴性菌（如大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌），并防止RNA变化（见图“RNAProect细菌试剂防止mRNA降解”和“基因芯片分析”）。在分离RNA之前，细菌可以在最小或复杂的培养基中生长。

基因芯片分析。

RNeasy从储存在多种条件下的RNAprotect稳定样品中纯化RNA，是下游过程（如northern印迹和RT-PCR）的理想选择。

原理

一旦采集到生物样本，其RNA就变得极不稳定。RNAprotect试剂和试管能够立即使RNA酶失活、稳定RNA并保持RNA表达模式。还可以防止由样本操作触发的基因诱导或下调，从而能够准确分析基因表达。这对于细菌表达谱尤其重要。RNA的酶促降解导致许多转录物的减少或丢失，因为细菌mRNA分子的半衰期非常短，只有几分钟。

RNAprotect组织试剂快速渗透组织，导致RNA立即稳定。RNAprotect细胞试剂可立即稳定分选或培养细胞中的RNA。细胞在室温下稳定，并可在RNA纯化前在环境温度下储存或运输。

步骤

为了保护RNA和储存样品，在收获后立即将组织样品浸入适当体积的RNA保护组织试剂中。RNAprotect组织管在可重新封闭的管中提供预先测量的RNAProect组织试剂体积，以便于处理和样品储存。该试剂可在37℃下保存RNA最多1天，在18–25℃下保存7天，或在2–8℃下保存4周，允许在没有液氮或干冰的情况下处理、运输、储存和运输样品。或者，样品也可以放置在-20°C或-80°C的温度下进行存档存储。

RNAprotect细胞试剂可立即稳定细胞中的基因表达谱。对于其他技术，有必要在添加RNA稳定试剂之前清洗或处理细胞（例如胰蛋白酶处理）。通过将RNAprotect细胞试剂直接添加到培养基或缓冲液中的细胞中，可以消除洗涤或处理步骤期间可能发生的表达变化。使用RNAprotect细胞试剂的瞬时RNA稳定也可以扩展到不在培养基或储存溶液中的颗粒细胞。起始材料的量不得超过1 x 107个电池。

对于细菌样品，在分离RNA之前，将两体积的RNAprotect细菌试剂直接添加到1体积的细菌培养物中，可立即稳定RNA。稳定化允许有时间使用多种方案进行有效的细菌裂解：酶裂解、机械破坏或两种方法的组合。QIAGEN建议使用TissueLyser进行有效的机械破坏。

应用

在RNAprotect试剂和试管中稳定的RNA可用于：

    · 总RNA纯化

    · miRNA纯化