产品介绍

NcmBlot blocking buffer（快速封闭液）是一种即用型，高效快速应用于 Western Blot 等实验的封闭液。封闭 时间仅需 10 分钟，效果优于脱脂奶粉、BSA、酪蛋白等传统封闭液，获得更高的信号，更低的背景值，信噪 比高。该试剂不含有哺乳动物来源的蛋白成分，避免与抗体发生交叉反应，适用于磷酸化的抗体，但不可用 于生物素标记的抗体。 

产品特色 

 · 即用型封闭液，无需配制

 · 封闭时间短，仅需 10 分钟

 · 背景低，信噪比高，优于常规奶粉等封闭的效果 

 · 不含哺乳动物来源的蛋白，适用于磷酸化的抗体 

操作步骤

1. 完成转膜后，将膜移入到平皿或者其他适合的容器中（可以不洗涤膜）。

2. 根据膜的大小，加入适量体积的 NcmBlot Blocking Buffer 封闭液，需完全浸没覆盖膜，对于 7.5x 8cm 的膜推荐使用量 5-10ml。

3. 置于水平摇床上，室温条件下振荡孵育 10 分钟。

4. 取出封闭完成的膜，用洗涤液冲洗蛋白膜 2-3 次，即可用于一抗孵育等后续 western blot 实验。 

保存条件

4℃保存，冰袋运输，至少 1 年有效。

注意事项 

1. 通常用于 PVDF 膜或 NC 膜的封闭时间为 10 分钟。对于背景低的抗体，可以缩短到 5 分钟，而对于一些背景 非常高的抗体，可以尝试将封闭时间延长为 30-60 分钟。

2. 没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的，因此对于一些特殊的实验或抗体，可能需要具体情况考虑使 用其它更合适的封闭液，比如奶粉、BSA 等封闭试剂。

3. 信号弱或者无信号：有可能是上样量不足；转膜效率低；抗体效价低，特异性差等原因造成，需要根据实验 情况进行调整 

4. 背景高：有可能是抗体使用量过多；蛋白膜洗涤时间不足；抗体和封闭液发生交叉反应；试剂或仪器设备被 污染等原因造成，需要根据实验具体情况进行调整。

5. 本产品仅限于科研使用，实验时请穿实验服并戴一次性手套操作。