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产品简介
酵母单杂的理论基础：许多真核生物的转录激活因子均具有2个功能独立的结构域——DNA结合结构域(DNA-binding domain BD )和DNA激活结构域(Activation domain AD)。前者特异结合于顺式作用元件上，后者实施基因表达调控功能，因此DNA结合结构域和DNA激活结构域可以分开使用，单独的结合结构域或转录激活结构域都不能启动下游报道基因的表达。酵母单杂交技术就是利用此原理构建各种基因与转录激活域融合的融合蛋白，只要转录激活域所融合的蛋白能与特异的DNA序列结合，也就是说它能够扮演转录因子结合结构域的功能，那么就会形成有功能的转录因子，激活选择报告基因AbAr的表达，产生抗性，能在特定浓度的选择培养上生长，从而确定DNA和蛋白有相互作用。
本方案中筛选诱饵酵母菌株的AbA最佳使用浓度和互作验证都采用了稀释点板的方法，与涂板的方法相比，点板法能更直观的体现出DNA和蛋白的互作，还能减少培养基和AbA的使用量。本方案中诱饵菌株鉴定采用了高保真酶，大大减少了操作步骤，另外本方案还对常见的酵母单杂结果进行了分析。
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