产品说明
CAS(Chrome azurol S)检测液是由铬天青(chrome azurol sulphonate, CAS)、溴化十六烷基三甲铵 (hexadecy- ltrimethyl-ammonium bromide, HDTMA)和铁离子组成的一种复合物,呈亮蓝色。当蓝色检测平板中的铁离子被微生物分泌的嗜铁素夺走时,CAS检测液由蓝色变成橘黄色,因此CAS液体培养基可用于微生物产嗜铁素的检测。
通常CAS液体培养基配制方法较为复杂,Coolaber对其配制方法进行改良,最大程度减少实验准备时间。该产品分为CAS培养基基础、10×缓冲剂和10×CAS检测液3个部分,其中缓冲液和CAS检测液已灭菌。CAS培养基中Pipes做缓冲剂,蛋白胨和葡糖糖提供氮源和碳源,钙盐和镁盐提供其他生长因子。
产品组成
使用方法(仅供参考)
1. 称取培养基121 g,加去离子水定容至800 mL,磁力搅拌溶解;
2. 115 ℃,20 min分别灭菌,冷却至60 ℃,向培养基基础中缓慢加入60 ℃预热的100 mL 10×缓冲液和100 mL 10×CAS检测液;
3. 将适量待测菌接种于CAS液体培养基,28 °C、180 r/min摇床培养,细菌培养2-3 d,真菌培养5-7 d;
4. 取适量菌液10000 r/min离心10 min,再取上清3 mL与CAS检测液等体积混合,黑暗中静置30 min,测630 nm处的吸光值(As),以双蒸水为对照调零。另取空白培养基与CAS检测液等体积混匀,以其吸光值作参比值(Ar),据根公式[(Ar-As)/Ar] × 100%计算,即得嗜铁素的相对含量。
5.结果参考,如图1。
图 1 嗜铁素检测
检测菌株
木霉属Trichoderma spp.、芽胞杆菌Bacillus spp.、气单孢菌Aeromonas sp.、假单胞菌Pseudomonas sp.、绿脓杆菌Pseudomonas aeruginosa、荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescensdeng等。
注意事项
1. 注意无菌操作,避免微生物污染。
2. 根据菌株生长特性,可适当调整缓冲液的pH值。
3. 该培养基仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其它用途。
4. 称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。
5. 干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。贮存于避光、干燥处。未开封产品保质期三年。开封后根据存放条件的不同保质时间存在一定的差异。
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