GAL4系统酵母双杂培养基套装

货号:YM2000
品牌:Coolaber
存储条件:RT
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YM2000-1Set 1 Set ¥1898.00 请登录 请登录

产品说明

Yeast Two-Hybrid Media Kit(YM2000酵母双杂培养基套装试剂盒)包含酵母双杂交文库筛选中所需要的全部培养基。整套购买,性价比更高。培养基以非常方便使用的铝箔袋形式包装,每个独立包装可以配制0.5 L的培养基。使用时仅需要将袋中的所有干粉倒入三角瓶或培养瓶中,加入0.5 L的ddH2O,然后121℃灭菌15分钟即可。无需称量和调整pH值。

Yeast Media Set 2 Plus Kit (YM2001)在Yeast Two-Hybrid Media Kit (YM2000)基础上增加了1 mg Aureobasidin A(1 mg/ml,甲醇溶液)和250 mg的X-α-Gal。

 

使用方法

Rich Liquid Media (Broth)

1. 序号1产品YPDA每袋干粉倒入三角瓶或培养瓶中,加0.5 L的去离子水中溶解。

2. 如有必要,调pH至6.5。121℃高压灭菌十五分钟。

3. 避光、室温条件下储存灭菌培养基备用。

 

Rich Plating Media with Agar

1. 序号2产品YPDA with Agar每袋干粉倒入三角瓶中,加0.5 L的去离子水中溶解(琼脂高压灭菌后溶解)。

2. 如有必要,调pH至6.5。121℃高压灭菌15分钟。

3. 冷却到50℃把培养基倒入平板中,室温使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱备用。

 

Minimal Liquid Media

1. 序号3、序号5产品,每袋干粉倒入三角瓶或培养瓶中,加0.5 L的去离子水,搅拌溶解。

2. 如有必要,调节pH 至5.8。121℃高压灭菌15分钟。

3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。

 

Minimal Plating Media with Agar

1. 序号4、6、7、8产品,每袋干粉倒入三角瓶中,加0.5 L的去离子水,搅拌溶解(琼脂高温灭菌后溶解)。

2. 如有必要,调节pH 至5.8。121℃高压灭菌15分钟。

3. 冷却到50℃把培养基倒入平板中,室温使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。

 

X-a-gal的使用方法:

(一)涂布于预制平板:

1. 储存液配制:溶解24 mg X-α-gal于6 mL DMF,终浓度为4 mg/mL。

2. 涂布200 μl(15 cm) 或者100 μl(10 cm)X-α-gal储存液于预制平板上。

3. 置于37 ℃培养箱至液体被吸收(DMF挥发性低,最长可放4小时)。

4. 将转化细菌或酵母涂于平板上,于37 ℃或30 ℃培养直至蓝色菌斑出现。

 

(二)直接加入培养基中:

1. 储存液配制:溶解60 mg X-α-gal于3 mL DMF,终浓度为20 mg/mL。

2. 将已灭菌固体培养基冷却至50-55 ℃。

3. 加入2-10 ml X-α-Gal储存液,混匀,快速倒平板。

 

AbA的使用方法:

1.本品为AbA的甲醇溶液,浓度为1 mg/ml,直接用作储存液。

2.灭菌后YPDA Agar培养基(PM2021)冷却至50-55 ℃,加入适量的AbA储液,倒板备用。(AbA工作浓度取决于宿主细胞的敏感度,见下表)

3.制备酵母感受态细胞并完成转化,参考SK2400,SK2401。

4.把100 μl完成转化酵母细胞悬液涂到含有适量AbA的YPDA Agar培养基平板上,30℃培养2-4天。

5.挑取克隆鉴定,或统计转化效率。

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