产品说明

Yeast Two-Hybrid Media Kit（YM2000酵母双杂培养基套装试剂盒）包含酵母双杂交文库筛选中所需要的全部培养基。整套购买，性价比更高。培养基以非常方便使用的铝箔袋形式包装，每个独立包装可以配制0.5 L的培养基。使用时仅需要将袋中的所有干粉倒入三角瓶或培养瓶中，加入0.5 L的ddH2O，然后121℃灭菌15分钟即可。无需称量和调整pH值。

Yeast Media Set 2 Plus Kit （YM2001）在Yeast Two-Hybrid Media Kit （YM2000）基础上增加了1 mg Aureobasidin A（1 mg/ml，甲醇溶液）和250 mg的X-α-Gal。

使用方法

Rich Liquid Media (Broth)

1. 序号1产品YPDA每袋干粉倒入三角瓶或培养瓶中，加0.5 L的去离子水中溶解。

2. 如有必要，调pH至6.5。121℃高压灭菌十五分钟。

3. 避光、室温条件下储存灭菌培养基备用。

Rich Plating Media with Agar

1. 序号2产品YPDA with Agar每袋干粉倒入三角瓶中，加0.5 L的去离子水中溶解（琼脂高压灭菌后溶解）。

2. 如有必要，调pH至6.5。121℃高压灭菌15分钟。

3. 冷却到50℃把培养基倒入平板中，室温使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱备用。

Minimal Liquid Media

1. 序号3、序号5产品，每袋干粉倒入三角瓶或培养瓶中，加0.5 L的去离子水，搅拌溶解。

2. 如有必要，调节pH 至5.8。121℃高压灭菌15分钟。

3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。

Minimal Plating Media with Agar

1. 序号4、6、7、8产品，每袋干粉倒入三角瓶中，加0.5 L的去离子水，搅拌溶解（琼脂高温灭菌后溶解）。

2. 如有必要，调节pH 至5.8。121℃高压灭菌15分钟。

3. 冷却到50℃把培养基倒入平板中，室温使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。

X-a-gal的使用方法：

（一）涂布于预制平板：

1. 储存液配制：溶解24 mg X-α-gal于6 mL DMF，终浓度为4 mg/mL。

2. 涂布200 μl（15 cm） 或者100 μl（10 cm）X-α-gal储存液于预制平板上。

3. 置于37 ℃培养箱至液体被吸收（DMF挥发性低，最长可放4小时）。

4. 将转化细菌或酵母涂于平板上，于37 ℃或30 ℃培养直至蓝色菌斑出现。

（二）直接加入培养基中：

1. 储存液配制：溶解60 mg X-α-gal于3 mL DMF，终浓度为20 mg/mL。

2. 将已灭菌固体培养基冷却至50-55 ℃。

3. 加入2-10 ml X-α-Gal储存液，混匀，快速倒平板。

AbA的使用方法：

1.本品为AbA的甲醇溶液，浓度为1 mg/ml，直接用作储存液。

2.灭菌后YPDA Agar培养基（PM2021）冷却至50-55 ℃，加入适量的AbA储液，倒板备用。（AbA工作浓度取决于宿主细胞的敏感度，见下表）

3.制备酵母感受态细胞并完成转化，参考SK2400，SK2401。

4.把100 μl完成转化酵母细胞悬液涂到含有适量AbA的YPDA Agar培养基平板上，30℃培养2-4天。

5.挑取克隆鉴定，或统计转化效率。