产品简介

G418 Sulfate（G418硫酸盐），也称作Geneticin（遗传霉素），是一种结构类似于庆大霉素B1（Gentamycin B1）的氨基糖苷类抗生素，通过影响80S核糖体功能和阻断延伸步骤来干扰蛋白合成，对原核和真核等细胞都有毒性,包括细菌、酵母、高等植物和哺乳动物细胞，也包括原生动物和蠕虫。其抗性基因（主要为neo基因）位于转座子Tn601（903）或Tn5（来源于细菌），但是可以在真核细胞中表达。通过基因重组技术将这些抗性基因导入细胞，使其获得对G418的耐药性，从而用来筛选和维持培养携带抗性基因的原核或者真核细胞。

哺乳动物细胞中，当抗性基因neo被整合进真核细胞基因组后，使其编码表达氨基糖苷磷酸转移酶（amino-glycoside 3’-phosphotransferase，APH(3)II）。此酶通过共价修饰G418的氨基或羟基功能，抑制抗生素-核糖体间的相互作用，从而使得抗生素失活。这一特性赋予细胞产生抗性。稳转细胞株筛选实验，需要建立杀灭曲线（剂量反应曲线）确定杀死无抗性细胞的最低有效浓度。

植物细胞中，通过转染携带nptII基因的抗性质粒孵育其抗性。nptII基因也能编码表达氨基糖苷磷酸转移酶，这个酶使得多种抗生素丧失活性，包括G418，卡那霉素和巴龙霉素。

注意事项

1、G418不可高压灭菌；

2、G418不要和其他的抗生素/抗真菌剂（如青霉素/链霉素）共同使用，因为它们是G418的竞争性抑制剂。其它的抗生素会产生交叉活性。

3、配制G418溶液时，要换算不同批次G418的活力值（potency），从而得到需要活性浓度的储存液以及工作液。

4、加入G418的培养体系，未转染的细胞未被杀死，可能因为药物浓度过低，或者细胞密度过高。快速分裂的细胞相对于缓慢增殖细胞，更容易被杀死。添加抗生素5-7天后可能才会杀死对照细胞（未转染），转染细胞（抗性克隆子）的克隆需要10-14天形成。

5、加入致死剂量的G418，细胞可能还会继续分裂2-3次。G418的药效通常在2天后才变得明显。

6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。