产品简介
二磷酸核酮糖羧化酶(EC 4.1.1.39)是植物光合作用中的一个关键酶,既控制着 CO2的固定,同时又制 约着碳素向 Calvin 循环和光呼吸循环分流,其活性的大小直接影响着光合速率。
在 Rubisco 的催化下,1 分子的核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)与 1 分子的 CO2结合,产生 2 分子的 3-磷酸 甘油酸(PGA),PGA 可通过外加的 3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的作用,产生甘油醛-3-磷酸,并使还原型辅酶Ⅰ(NADH)氧化。因此,340nm 吸光度的变化可计算还原型辅酶Ⅰ氧化速率,还原型辅酶 Ⅰ氧化速率可反映 Rubisco 的活性。
自备的仪器和用品
可见-紫外分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体 25mL×1 瓶,4℃保存;
提取液二:液体 25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:30mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存,临用前加入 12.5mL 试剂一,充分混匀备用,用不完的试剂分装后-20℃ 保存,禁止反复冻融;
试剂三:粉剂×1 瓶,-20℃保存,临用前加入 12.5mL 试剂一,充分混匀备用,用不完的试剂分装后-20℃ 保存,禁止反复冻融;
试剂四:粉剂×1 瓶,-20℃保存,临用前加入 1.25mL 试剂一,充分混匀备用,用不完的试剂分装后-20℃ 保存,禁止反复冻融;
(注意:试剂二、三、四溶解后,按需分装-20℃保存。)
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