产品简介

本产品采用了优化的双组分热启动DNA 聚合酶进行PCR扩增，通过在PCR 反应液中加入荧光探针，然后检测反应进程中的荧光强度，达到检测PCR 产物扩增量的目的。

本产品中双热启动酶构成了优化的酶活自动调节系统。酶活自动调节系统是由化学修饰的HotStar Taq DNA 聚合酶和抗体修饰的Anti Taq DNA 聚合酶组成，使SuperRealPreMix 在整个PCR 反应过程始终保持优良的DNA 聚合酶活力，配合精心优化Buffer 体系，从而具有定量准确，扩增效率高，重复性好和宽广的可信范围的特点。

本产品经过优化特别有利于Taq 酶发挥其5’-3’外切酶活性，充分释放探针的荧光信号。此外，SuperRealPreMix(Probe) 也充分降解了探针荧光淬灭基团的信号释放，经过上述优化，用相同量的模板将得到更强的信号。

试剂盒特点

■ 双核优势：双酶热启动系统，稳定性强，数据更准确。

■ 线性检测范围宽：可至少达 107 的线性检测范围。

■ 灵敏度高：可检测病毒，微生物等低丰度模板。

■ 扩增能力强：荧光信号更强。

储存条件

收到本产品后， 请立即置于-20℃保存。从-20℃取出使用时， 将冻存的2×SuperReal PreMix(Probe)和50×ROX Reference Dye融解，然后轻轻颠倒混匀，待溶液完全均一后再行使用。如解冻后没有使用，须彻底混匀后重新冷冻。(在解冻过程中盐会出现分层现象，未混匀进行冷冻，盐晶体的析出将会对酶造成损害)。如需一段时间内经常取用，可在2-8℃条件下储存3个月。避免反复多次冻融。

注意事项

■ PCR 反应的预变性条件必须设定为95 ℃ 15min，用以激活热启动酶。

■ 如果试剂没有混匀，其反应性能会有所下降。使用时请上下颠倒轻轻混匀，请不要使用振荡器进行混匀，尽量避免出现泡沫，并经瞬时离心后使用。

■ 引物终浓度为300 nM，探针终浓度为200 nM 可以在大多数体系中获得良好的扩增结果。

■ 需要进一步优化引物浓度的，可以在50-900 nM范围内调整；需要进一步优化探针浓度的，可以在100-500 nM 范围内调整。

■ 20 μl 反应体系中，基因组DNA 或cDNA 模板的使用量一般小于100 ng，逆转录产物作为模板时，使用量应不超过PCR 体系终体积的20%。

实验结果

宽广的线性检测范围

具有很宽的线性检测范围，对lamda DNA 可检测低至1 fg/μl 的模板，扩增效率高，重复性好，线性关系优异。

扩增能力强，扩增曲线更标准，灵敏度更高

扩增荧光信号强（扩增能力强），具有更标准的扩增曲线，灵敏度高，能准确定量检测低浓度模板，而T公司产品的检测信号弱，导致灵敏度低，可能导致低浓度模板时检测不到，产生假阴性结果。

仪器的广泛适应性

经实验验证，广泛地适用于在ABI、Stratagene、Roche、Bio-Rad 和Eppendorf 等各种荧光定量PCR 仪上采用Probe 法进行基因表达分析和核酸检测等实验。