RNeasy Protect Animal Blood System提供完整的方案,用于从动物血液中纯化高品质RNA。可将小鼠、大鼠或其他小动物的血液简单地收集在RNAprotect Animal Blood Tubes中,该收集管中装有的试剂可迅速稳定细胞RNA。然后应用RNeasy Protect Animal Blood Kit纯化总RNA。
RNAprotect Animal Blood Tubes收集的血液样本可在室温下方便的运输或在冰箱中简单的储存。样本可在15–25°C条件下保存48小时,2–8°C条件下保存两周,或在–20°C条件下保存至少三个月,不会出现明显的RNA降解(参见"Highly intact RNA")。动物血液收集在RNAprotect Animal Blood Tubes中可避免转录水平的变化,确保诸如real-time RT-PCR和生物芯片分析等应用中可靠的基因表达分析(参见"Effective transcript stabilization")。使用RNeasy Protect Animal Blood Kit纯化的RNA产量重复性好,只需不到30分钟的操作时间(参见"Reproducible RNA yields")。经验证的RNeasy技术纯化的RNA纯度高,没有基因组DNA污染。
采集血样的时候,基因表达谱可在几分钟内发生明显的变化。EDTA等抗凝血剂可避免血液凝固,但不能避免mRNA诱导的转录或调控引起的基因表达变化。将动物血液收集在RNAprotect Animal Blood Tubes中可避免转录水平的变化。对稳定的血液进行消化和匀浆后,使用RNeasy硅胶膜技术从样本中纯化RNA(参见"RNeasy Protect Animal Blood flowchart")。
血液样本收集在RNAprotect Animal Blood Tubes中。收集管中的试剂可裂解血液细胞并稳定细胞内的RNA。将RNAprotect Animal Blood Tubes离心使样本沉淀,沉淀水洗后重悬在Buffer RSB中。样本在Buffer RBT中被蛋白酶K消化后,样本离心通过QIAshredder离心柱后实现匀浆。在样本中加入乙醇后,离心通过RNeasy MinElute离心柱。使用DNase消化总DNA,并依次用Buffer RW1和Buffer RPE漂洗。用Buffer REB洗脱获得纯化的RNA。使用RNeasy Protect Animal Blood Kit纯化RNA可在QIAcube全自动核酸纯化仪上实现完全自动化。使用单独的实验方案可纯化包含miRNA的总RNA,并需使用漂洗液Buffer RWT(需单独订购;货号:1067933)。从分开的两部分样本中纯化小RNA(包含miRNA)和大RNA需使用RNeasy MinElute Cleanup Kit。
运用RNeasy Protect Animal Blood System纯化的总RNA和miRNA适用于多种下游应用,包括:
Features | Specifications |
Applications | PCR, qPCR, real-time PCR |
Elution volume | 45–70 µl |
Sample amount | 25–100 mg |
Main sample type | Tissue samples |
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | RNA |
Processing | Manual (centrifugation or vacuum) |
Format | 96-well plate |
Technology | Silica technology |
Yield | Varies |
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