产品简介
选育高固氮活性豆科植物品种是提高豆科植物固氮能力的一个有效途径。大豆根瘤菌固氮的最初输出产物主 要是酰脲(尿囊素和尿囊酸)。酰脲是大豆一根瘤菌共生固氮中的氮代谢产物,是氮素贮藏和运输的主要形式, 在大豆氮代谢中起着重要作用。可通过测定豆科植物组织中酰脲的含量,从而评估其固氮能力。
尿囊素在过酸或碱条件下水解产生乙醛酸,然后在苯肼和强酸条件下可被氧化,生成红色络合物,在 535 nm 处有特殊吸收峰,据此可由吸光值计算出样本中酰脲的含量。
溶液的配制
1、提取液 A 液:自备无水乙醇;
2、试剂五:临用前取 1 瓶加入 5 mL 蒸馏水溶解备用,可分装后-20℃保存,-20℃保存一周;
3、试剂六:自备浓盐酸;
4、标准品:10 mg 尿囊素。临用前加入 632.5 μL 蒸馏水配制成 100 μmol/mL 酰脲标准液。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、鼓风烘箱、1 mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、30~50 目 筛、研钵、冰和蒸馏水、无水乙醇、浓盐酸和 EP 管。
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