产品简介
乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD+/NADH之间互变。根据其催化底物-乳酸构型的不同,可分为D-乳酸脱氢酶(D-LDH,EC 1.1.1.28)与L-乳酸脱氢酶(L-LDH,EC 1.1.1.27)。
D-LDH催化NAD+氧化D-乳酸生成丙酮酸,丙酮酸进一步与2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
溶液的配制
1、 试剂二:临用前加入 1.6 mL 蒸馏水,充分溶解。用不完的试剂分装保存,-20℃可保存 4 周,避免反复冻 融;
2、 标准品:2 μmol/mL 丙酮酸钠溶液。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器/细胞超 声破碎仪、冰和蒸馏水。
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