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产品简介
4-香豆酸：辅酶 A 连接酶（4-coumarate:CoA ligase，4CL）是木质素生物合成的关键酶之一，主要催化肉桂酸 及其羟基或者甲氧基衍生物生成相应的辅酶 A 酯，这些中间产物随后进入苯丙类衍生物支路合成途径。该酶主要 存在于高等植物、酵母和菌类中，研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理，为减少水 果石细胞含量而提高其品质提供依据。
4CL 催化 4-香豆酸和 CoA 生成 4-香豆酸 CoA，其在 333nm 下测有特征吸收峰，测定 4-香豆酸 CoA 的生成速 率，即可反映 4CL 活性。
溶液的配制
1、 提取液：内含不溶物，使用前摇匀；
2、 试剂二：临用前加入 3 mL 蒸馏水溶解，可以分装后-20℃保存，避免反复冻融；
3、 试剂四：临用前用 4 mL 蒸馏水溶解备用，可以分装后-20℃保存，避免反复冻融；
4、 试剂五：加入 1 mL 乙醇溶解，临用前用蒸馏水稀释 40 倍后备用，现用现配；
5、 工作液的配制：按体积比将试剂二：试剂三：试剂四：试剂五=1:1:1:1 的比例配制工作液，现用现配。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、低温台式离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀 浆器、EP管、冰和蒸馏水。
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