产品简介
5'-核苷酸酶(5'-NT)是一种对底物特异性不高的水解酶,可作用于多种核苷酸。广泛存在于各种植物、动物组织、 血清血浆中。5'-NT 是一种特殊的磷酸酯水解酶,它作用于核苷-5'-磷酸如 AMP(腺苷-5'-磷酸或腺苷酸)生成无机磷 酸和核苷。通过定磷显色法测定所生成的无机磷含量,可以计算出 5'-NT 的活性高低。
溶液的配制
1、 试剂五:临用前加入 12 mL 蒸馏水,充分溶解,用不完的试剂 4℃保存两周。
2、 试剂六:临用前加入 12 mL 蒸馏水,充分溶解,用不完的试剂 4℃保存两周。
3、 工作液配制:临用前取 1 支试剂一中加入到 1 瓶试剂二中充分溶解;用不完的试剂-20℃分装保存一周, 现用现配。
4、 定磷试剂的配制:按 H2O:试剂五:试剂六:试剂七=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷试剂应为浅黄色。 若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染(请根据需要,用多少配多少)。
5、 标准品:8 mg 磷标准品。临用前加入 4.6 mL 试剂四溶解配制成 10 μmol/mL 的标准溶液,溶解后 4℃保 存两周。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品
天平、可见分光光度计、台式离心机、低温离心机、恒温水浴锅/恒温培养箱、1 mL 玻璃比色皿、可调式移 液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
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