产品简介
本试剂盒适用于从PAGE凝胶中回收DNA片段和Oligo的产品。适用于回收100bp以下的双链DNA片段,包括长度在20nt左右的单链DNA(Oligo)。
操作步骤
1. 进行PAGE电泳,电泳后染色观察DNA并确定要回收的DNA的条带位置。
2. 小心切取含DNA片段的PAGE凝胶。尽可能切去多余的凝胶,凝胶重量控制在0.3g以下。
注意:如果胶孔大,胶体积大,需要按比例增加试剂的用量。
3. 将凝胶块转移到1.5mL的离心管中,用枪头或者微型研磨棒充分捣碎。
4. 在破碎的凝胶中加入0.3mL 的裂解液I,将离心管水平放置于摇床上摇晃1-10个小时。如果DNA片段小于100bp,摇晃3个小时足够;如果片段大小大于300bp,可以过夜摇晃。
5. 12000rmp/min 离心3min,小心吸取上清到另一个1.5mL离心管中,并在沉淀中重新加入0.2mL 的裂解液I,充分吹打沉淀。
6. 12000rmp/min 离心3min,小心吸取上清加入上步所得的上清中(共0.5mL)。
7. 在上清液中加入1mL(2倍体积)的沉淀液II,充分颠倒混匀(-20℃静置30min有助于DNA的沉淀)。
8. 12000rmp/min 离心15min,小心吸弃上清。
9. 在沉淀中加入1mL 的洗涤液III,重悬沉淀。12000rmp/min 离心5min,小心吸弃上清。
10. 晾干,加入合适体积的TE(>30uL)溶解DNA沉淀。
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