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| ■ 识别位点 | ||||||
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| ■ 制品内容 | ||||||
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| ■ 制品说明 | ||||||
| □ 起源：Proteus vulgaris | ||||||
| □ 反应温度：37℃ | ||||||
| □ 活性检测：1 μl QuickCut限制酶在50 μl 1X QuickCut Buffer或1X QuickCut Green Buffer的反应体系中，在37℃条件下，经过5 min反应，将1 μg λ DNA完全消化所需要的酶量。 | ||||||
| □ 活性测定用底物：λ DNA | ||||||
| □ Star活性：Mn2+存在条件下，识别序列会发生变化 | ||||||
| □ 质量控制： 1) 功能检测： 在1 μg线性DNA中加入1 μl QuickCut限制酶，在50 μl反应体系中，37℃保温5 min，能完全消化线性DNA。 2) Star Activity Test： 在1 μg DNA中加入1 μl QuickCut限制酶，进行16 hr酶切反应，然后进行琼脂糖电泳，DNA片段的电泳谱带不发生变化。 3) Labeled Oligonucleotide Assay (LOA) Test： 在荧光标记的寡核苷酸中加入1 μl QuickCut限制酶，37℃保温1 hr，分解率小于10%。 | ||||||
| □ 甲基化的影响：受CG methylase的影响，但不受dam metyhlase的影响。 | ||||||
| □ 使用注意： 1) 因该酶切出的突出末端比一般的2个碱基突出末端的连接效率低，所以必须使用平滑末端的连接条件。 2) 不建议进行16 hr以上酶切，易导致星活性。 3) 使用QuickCut限制酶进行双酶切或多酶切反应时，加入限制酶的总体积不能超过反应体系的1/10量；如果各酶的反应温度不同，建议按低温到高温的顺序加入相应的QuickCut限制酶进行分步酶切反应。 4) 10X QuickCut Green Buffer可能会干扰酶切产物的荧光分析。因此，酶切产物荧光分析检测时推荐使用无色的10X QuickCut Buffer。 5) 10X QuickCut Green Buffer如出现沉淀，室温下振荡5分钟可使沉淀完全溶解，不影响使用。 |
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