产品简介

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（EC 4.1.1.31）广泛存在于植物和微生物中，是催化磷酸烯醇式丙酮酸与二氧化碳反应生成草酰乙酸呈不可逆反应的酶，同时也是 C4 植物和 CAM 植物固定 CO2的关键酶，对三羧酸循环的运转起重要调节作用。

PEPC 催化磷酸烯醇式丙酮酸和 CO2 生成草酰乙酸和 HPO4 2-，苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和 NADH 生成苹果酸和 NAD+，在 340nm 测定 NADH 减少速率，计算 PEPC 活性。

溶液的配制

1、 试剂四：临用前加入 4 mL 双蒸水充分溶解待用；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；

2、 试剂五：临用前加入 4 mL 双蒸水充分溶解待用；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；

3、 试剂六原液：液体置于试剂瓶内 EP 管中；

4、 试剂六工作液配制：将试剂六原液：试剂六稀释液=1.6μL：328.4μL 稀释，用多少配多少；

5、 试剂七：临用前加入 5 mL 双蒸水，用不完的试剂可分装后-20℃保存，避免反复冻融；

6、 工作液的配制：根据测定样本数量按体积比试剂二、试剂三、试剂四、试剂五、试剂六工作液、试剂七=15:15:15:15:19:19 的比例混合。工作液现用现配。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL 石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。