产品简介
GAPDH(EC1.2.1.12)催化 3-磷酸甘油醛氧化生成 1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途径的关键酶,与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关,在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和 ATP 生成 1,3-二磷酸甘油酸。GAPDH 逆向催化 1,3-二磷酸甘油酸和NADH 生成 3-磷酸甘油醛、无机磷和 NAD+,340nm 处测定 NADH 的减少量可反映 GAPDH 活性的高低。
溶液的配制
1、 试剂三:液体置于试剂瓶内 EP 管中。根据用量按照试剂三:蒸馏水为 3:100 的体积比例充分混匀,现用现 配。
2、 工作液的配制:将试剂二全部倒入试剂一瓶中,充分溶解,根据需要取一定的量 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热 10min;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、1mL 石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
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