产品说明
Bradford蛋白浓度测定试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)是根据Bradford法研制而成,实现了蛋白浓度测定的快速,稳定和高灵敏度。该产品具有检测速度快,10-20个样品只需不足10分钟即可完成;灵敏度高,检测浓度下限达25 µg/mL,最小检测蛋白量达到0.5 µg,样品体积1-20 µL;在50-1000 µg/mL浓度范围内有较好的线性关系,且1小时内稳定,5-20 min之间,稳定性最好。
Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。耐受β-巯基乙醇的浓度可高达1 M,二硫苏糖醇的浓度可高达5 mM。但受略高浓度的去垢剂影响,需确保SDS低于0.05%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20、Tween 60或Tween 80低于0.02%,含去垢剂的样品推荐使用Coolaber生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(SK1070)。
储存条件
蛋白标准液-20 ℃储存,其它组分常温储存,有效期12个月。
使用说明
1.取适量BSA蛋白标准液,用PBS稀释液稀释至终浓度为0.5 mg/mL,即为BSA蛋白标样。
2.取适量G-250染色液(5×),按1:4加水稀释成1×G-250染色液,需现配现用。
将BSA蛋白标样,以及适当稀释的蛋白样品,按下表顺序加入96孔板中,标样需用PBS稀释液补足到20 µL。每孔加入1× G-250染色液200 µL,室温放置3-5 min。
注:BSA标样浓度(µg/mL)分别为:0、25、50、100、200、300、400、500。
4.用酶标仪测定A595的吸光度,或选择560-610 nm之间波长。绘制标准曲线并计算出样品中的蛋白浓度。
注意事项
1. G-250染色液(5×)使用前请颠倒3-5次,混匀。
2. BSA蛋白标准液请在完全溶解后先混匀,再稀释成BSA蛋白标样。
3. G-250染色液恢复到室温再使用,有利于提高检测的灵敏度。
4. 需可检测560-610 nm之间波长的酶标仪一台,最佳检测波长为595 nm。并需96孔板。
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